SignalEnhance免疫组化试剂盒（Mouse）是高敏感性试剂盒。用聚合标记方法将过氧化物酶连接到二抗上，形成超大分子抗体-酶聚合物 (HRP polymer)，替代传统方法中的二抗或者三抗。这种聚合物拥有强大的信号放大能力，同时有很强的组织细胞渗透力，特别适合免疫组化的应用。此系列检测试剂与传统的方法比较具有简单，快速，高敏感，低背景等特点。

如图所示，A使用Abmart常规二抗（M21001）染色结果，B为SignalEnhance IHC Kit（A10027）染色的结果。实验材料为石蜡包埋的人胃癌组织样本，一抗为一个膜蛋白的小鼠单抗。

结果显示：B图有明显的膜阳性染色，且背景很干净。

4℃可保存一年，应避免冷冻。

包装清单

1. 防脱玻片

2. PBS（pH7.2-7.6）

3. 抗原修复液（推荐使用柠檬酸钠-EDTA抗原修复液，同时具有柠檬酸钠和EDTA 抗原修复液的优点。货号：A10028）

石蜡切片热修复抗原染色程序：

1. 制备切片，常规脱蜡至水。

2. 添加内源性过氧化物酶阻断剂（3%H2O2），室温10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗2分钟×3 次。

3. 根据抗原抗体情况，必要时对切片进行抗原热修复或消化处理。

4. 滴加封闭液,室温10分钟。甩去多余液体, 不洗。

5. 滴加适当稀释的一抗（小鼠IgG），20-37℃ 1~2小时或4℃过夜。0.01M PBS洗2分钟×3次。（一抗的稀释度、孵育时间、温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间；背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间。

6. 滴加聚合 HRP 标记抗鼠IgG， 37℃孵育30分钟，PBS或TBS冲洗，2分钟×3次。

7. DAB显色：取1ml蒸馏水，加试剂盒中A,B,C 试剂各50ul，混匀后加至切片。室温显色, 镜下控制反应时间，一般5-30分钟。蒸馏水洗涤。

8. 苏木素轻度复染，脱水，透明，封片，观察。

血涂片，细胞和冰冻切片染色程序：

1. 载玻片经防脱片剂处理（Poly-L-Lysine）。抗凝血经分层离心后涂片；培养细胞也可涂片或贴片生长；冰冻切片室温风扇吹干。

2. 固定方案用4%多聚甲醛或丙酮固定10-20 分钟。

3. 30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温浸泡30 分钟，以灭活内源性过氧化物酶。蒸馏水洗1-2 次。

其余步骤和石蜡切片3-8 步相同。

如果冰冻切片直接染色结果不理想时,可以参照石蜡切片对切片进行热修复，步骤和石蜡切片3-8 步相同。

1.如果组织材料为小鼠组织样本，可能会由于组织中残留的小鼠血液导致背景信号过强，推荐使用mouse on mouse实验的专用封闭液。货号：A10025 IHC封闭液（鼠源组织避免交叉反应专用款）。