抗体开发和验证平台

快速、高效、高性价比的抗体开发和验证平台,量身打造蛋白功能研究个性化工具箱
抗体开发和验证平台

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单克隆抗体定制服务

蛋白单抗制备

多肽单抗制备

修饰性单抗制备

小分子单抗制备

服务内容

1.重组蛋白抗原制备(可溶蛋白/包涵体蛋白);   

2.免疫3-6只小鼠;   

3.细胞融合,3轮杂交瘤细胞筛选,建株>10株细胞株;   

4.腹水制备及抗体纯化;  

1.抗原设计;   

2.多肽合成(6条多肽/12条多肽);   

3.免疫3-6只小鼠;  

4.细胞融合,3轮杂交瘤细胞筛选,建株>10株细胞株;   

5.腹水制备及抗体纯化;  

1.抗原设计和多肽合成(修饰多肽+对照多肽);   

2.免疫3-6只小鼠;   

3.细胞融合,3轮杂交瘤细胞筛选、建株;   

4.腹水制备及抗体纯化;  

1.抗原设计和合成;   

2.免疫3-6只小鼠;  

3.细胞融合,3轮杂交瘤细胞筛选、建株;   

4.腹水制备及抗体纯化;  

制备周期

90-100天:客户提供蛋白;

120-140天:客户提供含有目的基因序列的质粒;

110-120天:客户提供蛋白信息;

110-120天:客户提供蛋白修饰位点信息;

120-150天:客户提供可以用于偶联的小分子原料,或者由Abmart代为合成;

交付标准

1. 至少交付10个抗体小样;

2. WB验证:至少识别0.1-1ng的重组蛋白;

拟内源验证:至少识别0.1-1ng的目的蛋白;

拟内源验证实验详细说明见下

1. 至少交付10个抗体小样;

2. ELISA检测/Dot blot检测:至少识别0.01-0.25ng的多肽抗原;

1.至少交付2株杂交瘤腹水;   2.DB检测,目的肽灵敏度0.1-1ng   3.目的肽检测灵敏度是对照肽检测灵敏度的100倍以上,或对照肽不识别;   1.至少交付1-5株杂交瘤腹水;   2.根据小分子的不同,交付不同IC50检测灵敏度的抗体(具体详询);  

产品优势

1.交付标准高,抗体亲和力好,客户内源应用成功率有保证;   

2.提供更多抗体小样,给予更多抗体应用可能;  

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1.免疫多肽数量是常规方式的6-10倍,提供更高成功率保证;   

2.提供更多抗体小样,给予更多抗体应用可能;  

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1.抗体识别修饰性多肽的灵敏度是对照肽的100倍以上,更高的内源检测的特异性识别; 

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1.   个性化设计,满足客户不同需求

2.   抗体识别小分子抗原的亲和力高;

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适用客户

1.研究蛋白内源表达丰度较低,例如转录因子、蛋白激酶等;  

  2.对实验要求较高,希望能够做WBIFIP等多种实验;  

1.研究蛋白为多次跨膜蛋白,无法通过表达蛋白制备抗体;   

2.同源家族蛋白较多,需要区分;  

1.研究蛋白的内源表达丰度低;   

2.研究的修饰位点在体内的修饰水平低;  

1. 检测产物为小分子化合物,需要多样,个性化;

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多抗定制服务

蛋白多抗制备

多肽多抗制备

修饰性多抗制备

服务内容

1.重组蛋白抗原制备(可溶蛋白/包涵体蛋白);  

2.免疫2只兔子;   3.抗体纯化;  

1.抗原设计;  

 2.多肽合成;  

 3.免疫2只兔子;   

4.抗体纯化;  

1.抗原设计和多肽合成(修饰多肽+对照多肽);   

2.免疫4只兔子;  

3.抗体纯化;  

制备周期

90-100天:客户提供蛋白;

120-140天:客户提供含有摩的基因序列的质粒;

110-120天:客户提供蛋白信息;

110-120天:客户提供蛋白修饰位点信息;

交付标准

1.ProA/G纯化抗体,每个含有≥10mg抗体;   

2.ELISA效价≥50K  

1. 交付所有获得抗体,每个含有0.5-2mg抗体;

2. 交付冻干裸肽0.2-1mg

3. ELISA效价≥50K

1.交付所有获得抗体,每个含有0.5-2mg抗体;   

2.交付修饰性和非修饰性裸肽0.2-1mg   3.ELISA效价大于50K,针对免疫检测原效价和非修饰性区分检测原效价的比值   ≥8倍;  

适用客户

1.研究蛋白内源表达丰度较高;   

2.候选蛋白较多,费用预算优先;  

1.研究蛋白的同源家族蛋白较多,需要区分;  

1.研究蛋白的修饰情况不确定;  

  2.研究的修饰位点在体内的修饰水平较高;  

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多表位高亲和力的单抗库技术 - SEAL™

革命性的技术带来前所未有的快捷,高效,物美,价廉。通过提高交付抗体的数量,有效提高抗体应用成功的几率。

 

传统单抗制备方法是一个复杂的费时费力的过程:一般只会运用一个抗原,一次免疫,一个融合,得到少数几个克隆。这种简易甚至是简陋的方法常常得不到有效的抗体。并且这种方式得到的抗体模式非常单一,对于应用到像流式细胞仪和免疫共沉淀,或者是膜蛋白受体,转录因子研究等常常无能为力。

 

SEAL™(Surface Epitope Antibody Library)抗体库的诞生就是为了克服这种费时费力的,不断尝试返工的研究模式。通过其抗体数量优势有效的覆盖了失败的风险,确保了成功的概率。SEAL™运用多个抗原,多次免疫,多次融合以及大量细胞系筛选,确保了能得到大量针对不同抗原表位的高亲和力抗原。与此同时, SEAL™技术对于单一抗原开发的成功率是传统方法的10倍以上,如果再计算上Abmart运用的大量抗原方案,成功率甚至能提升更高。所以说通过SEAL™库,无论哪种应用,您收获成功抗体的几率都得到了极大的提升。而生产出的这些抗体,能广泛应用于流式细胞仪、免疫共沉淀、免疫荧光等应用。

 

受益于我们超凡的抗体开发技术,我们做到只要您想得到的蛋白,我们就能提供相应的抗体。从此,科研变得无拘无束。

重组蛋白ng级别WB保证的单克隆抗体

通常情况下,一个抗体能否用于组织样本或者细胞样本中的内源蛋白检测,主要取决于以下三个因素:1、蛋白性质和抗体应用;2、抗体质量;3、实验方法。上述几个因素中,往往是由于抗体的质量无法达到内源检测的要求,即抗体需要能够检测到多少个分子的内源蛋白。众所周知,不同的蛋白在不同的组织或者细胞中的表达量相差非常大。例如,某些GPCR分子或者转录因子分子的表达量非常低,一个细胞仅仅表达几百个蛋白分子,10ug的总蛋白提取样本中目的蛋白含量仅有万分之一。这种情况下,就需要极高亲和力的抗体来进行内源检测(抗体至少能够识别1ng的蛋白含量)。

 

我们针对单克隆抗体制备的技术路线进行了针对性优化,独创了免疫增强因子的高免疫反应技术,通过多轮次的单克隆抗体亲和力筛选,保证最终得到的抗体亲和力能够达到识别ng级别的重组蛋白WB检测。

30天快速单抗定制开发 - PETAL™

革命性的单克隆抗体筛选技术,通过预先制备超大容量单克隆抗体库理念,快速筛选每一个蛋白合适的多肽表位的单克隆抗体,从而大大缩短了抗体制备周期。

 

PETAL™技术跨越了常规免疫技术在动物免疫步骤上的时间限制因素,取而代之地,通过对一个预先制备好的超大容量单克隆抗体库进行筛选。以获得对目的蛋白特异识别的抗体。此抗体库是通过生物信息学分析,人工合成对自然界中已知蛋白具有代表性的几万条多肽和蛋白功能域片段,经逐条免疫并汇总所有获得单克隆抗体而形成的。对任意目的蛋白,我们会设计合成多条多肽筛选原(8-30条,10-14氨基酸长),用这些多肽对点支撑芯片形式的抗体库进行筛选,以得到所需要的抗体。

 

我们科研团队已经对来源于100多种生物的400多种蛋白的超过5000条多肽筛选原进行了抗体库的筛选验证,结果表明:60%以上的多肽筛选原可以在库中找到对应的识别抗体,平均每个识别抗体可以获得2个高亲和力的抗体(在dot blot试验中检测到<1ng的筛选原多肽,相当于Sigma公司FLAG抗体的亲和力)。

 

基于此概率,如果对目标蛋白选取>=4条多肽进入筛选,可以得到至少1条识别目标抗原的单克隆抗体,而其费用仅相当于购买一个目录抗体的价格。更为重要的是,包括合成多肽及筛选验证的时间仅需4-6周,大大缩短了研发周期。

蛋白修饰位点特异单克隆抗体

蛋白质磷酸化对于许多生物现象的引发是很必要的,包括细胞生长、增殖、泛素(ubiquitin)介导的蛋白降解等过程。然而,磷酸化修饰在细胞中所占的比例却非常低。大概10%的细胞蛋白会受到磷酸化共价修饰,每100次蛋白的磷酸化修饰中仅有1次酪氨酸基团的修饰。与大部分细胞中的丝氨酸和苏氨酸磷酸化水平相比,酪氨酸磷酸化的水平估计要低2000倍。

 

正如上面的描述,由于磷酸化水平非常低,往往实验中用到的抗体很难特异性的识别磷酸化修饰的目的蛋白,这时候就需要一个特别高亲和力的抗体来做磷酸化修饰的研究。目前我们推出一个特别针对磷酸化修饰的抗体定制服务,保证制备的单抗均有很高的抗体亲和力,针对目的蛋白磷酸化修饰多肽可以达到ng级别的检测灵敏度。

WB拟内源验证实验

您的困境:抗体在重组蛋白或者过表达材料中结果很好,但内源材料检测不work;

原因多种

1. 内源验证实验没做好?——重新做,反复实验浪费时间,浪费精力;

2. 内源实验材料没有准备好,或者蛋白没有提取好?——没有内源检测抗体,也没法判断呀;

3. 抗体质量问题?——明明外源检测结果很好,怎么进一步判断抗体行与不行呢?

… …

核心问题:抗体和内源材料均没有客观的评价体系和标准。

解决方案:“拟内源验证”保证的抗体定制服务解决这类问题。拟内源验证,即完全模拟内源环境,来定量检测抗体在内源体系中的检测灵敏度极限。

优点是

1.      极大的保证了抗体在内源材料中使用的成功率;

2.      帮助实验人员确定抗体在内源体系下可以检测到的蛋白最低含量;

3.      可以明确下一步是提升抗体质量还是改善实验材料和优化实验过程;

图示案例:右图No.15的抗体检测结果,在拟内源实验材料中,抗体可以很好地检测到1ng的蛋白含量,换算为相对蛋白含量为万分之0.5(目的蛋白/总蛋白)。如果此抗体内源检测效果不好就应该优先考虑优化实验材料,因为再找到亲和力更高的抗体概率很低。


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