辅助产品Others-通用增强型抗原修复液 (柠檬酸钠-EDTA,40X)

Datasheet

产品描述:

1. 柠檬酸钠-EDTA 抗原修复液(Citrate-EDTA Antigen Retrieval Solution)是一种常用的抗原修复液,结合了柠檬酸钠和EDTA进行抗原修复的优点,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。

2. 细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从

而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。

3. 本抗原修复液采用了常用的柠檬酸钠缓冲液和EDTA,结合了两者修复抗原的优点,并经过适当优化,可以更加有效地去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。

4. 通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。

5. 本产品特别适合用于石蜡切片,也可以用于冰冻切片等其它样品。

6. 一个包装的本产品可以配制成4000 mL抗原修复液(1X)。按照每个片子需要10毫升抗原修复液(1X)计算,一个包装的本产品可以用于400个样品。


产品储存

4℃或-20℃保存,一年有效。

使用方法:

1. 对于石蜡切片:

a. 脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡5 分钟,再换用新鲜的二甲苯脱蜡,共用二甲苯脱蜡3 次。无水乙醇5 分钟,两次。90%乙醇5 分钟,两次,70%乙醇5 分钟,一次。蒸馏水5 分钟,两次。

b. 抗原修复:将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95-100℃加热约5分钟2(加热时间可以控制在10-20 分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)

使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用

微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30 分钟内冷却至室温。用

PBS 洗涤液洗涤1-2 次,每次3-5 分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。

2. 对于冰冻切片:

PBS 洗涤液洗涤切片5 分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95-100

加热约5 分钟X2 (加热时间可以控制在10-20 分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和

目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,

也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约

20-30 分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2 次,每次3-5 分钟。随后即可进行封

闭等后续的免疫染色步骤。

3. 对于其它样品的抗原修复:

可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。


注意事项

1.       如果组织材料为小鼠组织样本,可能会由于组织中残留的小鼠血液导致背景信号过强,推荐使用mouse on mouse实验的专用封闭液。货号:A10025 IHC封闭液(鼠源组织避免交叉反应专用款)。

2.       IHC实验建议使用带有酶聚合物(HRP polymer)标记二抗或者试剂盒,可有效增强IHC显色反应。推荐货号:A10026 SignalEnhance IHC KIT(信号增强型免疫组化试剂盒,兔一抗)和A10027 SignalEnhance IHC KIT(信号增强型免疫组化试剂盒,鼠一抗)。

Storage Condition

Store at -20°C long term.

A10028

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