辅助产品Others-SignalEnhance IHC KIT(Rabbit) (信号增强型免疫组化试剂盒,兔一抗)

Datasheet

产品描述:

SignalEnhance免疫组化试剂盒(Rabbit)是高敏感性试剂盒。用聚合标记方法将过氧化物酶连接到二抗上,形成超大分子抗体-酶聚合物 (HRP polymer),替代传统方法中的二抗或者三抗。这种聚合物拥有强大的信号放大能力,同时有很强的组织细胞渗透力,特别适合免疫组化的应用。此系列检测试剂与传统的方法比较具有简单,快速,高敏感,低背景等特点。

 

如图所示,A使用Abmart常规二抗(M21002)染色结果,BSignalEnhance IHC KitA10026)染色的结果。实验材料为石蜡包埋的人胃癌组织样本,一抗为一个膜蛋白的兔单抗。

结果显示:B图有明显的膜阳性染色,且背景很干净。

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产品储存

4℃可保存一年,应避免冷冻。

包装清单

试剂盒组分

A10026S

A10026M

封闭液(5%BSA

5 ml

15 ml

内源性过氧化物酶阻断剂(3%H2O2

5 ml

15 ml

Anti- Rabbit IgG HRP-Polymer

5 ml

15 ml

DAB显色试剂ADAB×20倍浓缩液)

1 ml

3 ml

DAB显色试剂BH2O2×20倍浓缩液)

1 ml

3 ml

DAB显色试剂CTBS×20倍浓缩缓冲液)

1 ml

3 ml

 


自备试剂及耗材:

1.         防脱玻片

2.         PBSpH7.2-7.6

3.         抗原修复液(推荐使用柠檬酸钠-EDTA抗原修复液,同时具有柠檬酸钠和EDTA 抗原修复液的优点。货号:A10028



使用方法:

石蜡切片热修复抗原染色程序:

1.         制备切片,常规脱蜡至水。

2.         添加内源性过氧化物酶阻断剂(3%H2O2),室温10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗2分钟×3 次。

3.         根据抗原抗体情况,必要时对切片进行抗原热修复或消化处理。

4.         滴加封闭液,室温10分钟。甩去多余液体, 不洗。

5.         滴加适当稀释的一抗(兔 IgG),20-37 1~2小时或4℃过夜。0.01M PBS2分钟×3次。(一抗的稀释度、孵育时间、温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间。

6.         滴加聚合 HRP 标记抗兔IgG 37℃孵育30分钟,PBSTBS冲洗,2分钟×3次。

7.         DAB显色:取1ml蒸馏水,加试剂盒中A,B,C 试剂各50ul,混匀后加至切片。室温显色, 镜下控制反应时间,一般5-30分钟。蒸馏水洗涤。

8.         苏木素轻度复染,脱水,透明,封片,观察。

 

血涂片,细胞和冰冻切片染色程序:

1.         载玻片经防脱片剂处理(Poly-L-Lysine)。抗凝血经分层离心后涂片;培养细胞也可涂片或贴片生长;冰冻切片室温风扇吹干。

2.         固定方案用4%多聚甲醛或丙酮固定10-20 分钟。

3.         30%H2O2  1+纯甲醇50份混合,室温浸泡30 分钟,以灭活内源性过氧化物酶。蒸馏水洗1-2 次。

其余步骤和石蜡切片3-8 步相同。

如果冰冻切片直接染色结果不理想时,可以参照石蜡切片对切片进行热修复,步骤和石蜡切片3-8 步相同。


Storage Condition

Store at -20°C long term.

A10026

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